4、高效果腺体外抗氧化活性试验
(1)对DPPH自由基的液相氧化清除能力
以质量浓度为横坐标,清除率为纵坐标作图,色谱素得到各样品质量浓度与DPPH自由基清除率的法测关系,试验结果见图2~5。定黑由图2~5可知,肋花随着各样品质量浓度的楸提取物增加,对DPPH自由基的中氯清除率均逐渐升高。当黑果腺肋花楸提取物供试液浓度为186.40μg/mL,化矢含量矢车菊素-3-O-葡萄糖苷供试液浓度为15.04μg/mL,车菊氯化矢车菊素供试液浓度为5.19μg/mL,及抗究VC供试液的性研浓度为12.76μg/mL时,清除率均可达到50%,高效果腺试验结果见表3,液相氧化氯化矢车菊素对DPPH自由基的色谱素清除能力最强,黑果腺肋花楸提取物对DPPH自由基具有一定的清除活性。
(2)FRAP法测定总的抗氧化能力
以FeSO4浓度C为横坐标,测得的吸光度A为纵坐标,进行线性拟合,得到FeSO4标准曲线为:A=0.0262C一0.0275,R2=0.9996。将测得的样品吸光度值带入标准曲线方程,抗氧化活性以相同吸光度值的FeSO4当量浓度表示,记为FRAP值。由图6~9可知,当VC样品液的浓度为7.27μg/mL,黑果腺肋花楸提取物供试液的浓度为157.7μg/mL,矢车菊素样品液浓度为11.35μg/mL,氯化矢车菊素样品液浓度为5.52μg/mL,硫酸亚铁当量浓度可达到30μg/mL,试验结果见表3,说明氯化矢车菊素的还原能力最强,黑果腺肋花楸提取物具有一定的还原能力。
(3)钼酸铵法测定总的抗氧化能力
以VC质量浓度为横坐标,测得的吸光度A为纵坐标,进行线性拟合,得到VC抗氧化能力标准曲线为:A=240.28C-101.67,R2=0.9966。将测得的样品吸光度值带入标准曲线方程,抗氧化活性以相同吸光度值的VC当量浓度表示。由图10~13可知,当氯化矢车菊素样品液的浓度为0.082mg/mL,黑果腺肋花楸花青素供试液的浓度为1.63mg/mL,矢车菊素样品液浓度为0.1722mg/mL,VC当量浓度可达到30μg/mL,试验结果见表3,说明说明氯化矢车菊素的还原能力最强,黑果腺肋花楸提取物具有一定的还原能力。
三、结论与讨论
1、本试验对黑果腺肋花楸提取物中氯化矢车菊素含量的HPLC测定方法进行考察,结果表明建立的含量测定方法操作简便,精密度高,重复性及线性关系良好;
2、本试验采用酸化甲醇溶液经沸水浴水解提取花青素,在相关文献的基础上,通过正交试验进一步考察了水解提取花青素工艺参数,试验结果表明,最佳提取工艺为:水解温度100℃、水解时间2h、溶剂酸浓度3%盐酸甲醇。在优化水解提取条件下,氯化矢车菊素的含量为1.8570mg/g。该方法操作简单,具有快速、高效、环保等优点,为黑果腺肋花楸果活性成分的提取提供了一种新方法;
3、体外抗氧化活性的试验结果表明:黑果腺肋花楸提取物对DPPH自由基具有一定的清除活性,随着其质量浓度的增加,清除活性明显增强,并且氯化矢车菊素对DPPH自由基的清除能力强于黑果腺肋花楸提取物;FRAP法和钼酸铵法测定各样品液总还原力,结果表明黑果腺肋花楸提取物具有一定的抗氧化活性,两种测定方法中氯化矢车菊素的抗氧化性最强。上述试验结果为黑果腺肋花楸果在食品、饮料、制药等领域的应用提供了工作基础,为黑果腺肋花楸果的工业化生产提供了理论依据。
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